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了解尊龙凯时的THP-1培养细节吗?

发布时间:2025-03-02   信息来源:尊龙凯时官方编辑

细胞简介

该细胞系源自一名1岁急性单核细胞性白血病男患者的外周血。其具备吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力,细胞膜和胞浆内不含免疫球蛋白,且表达C3R和FcR。细胞可通过佛波酯TPA诱导向单核系方向分化,并且可作为转染宿主。

了解尊龙凯时的THP-1培养细节吗?

细胞信息

细胞名称:

Thp-1人单核细胞白血病

生长特性:

  • 悬浮培养,低密度易聚团,高密度时分散
  • 倍增时间:60-70小时(PubMed=6970727),26小时(PubMed=25984343),~35-50小时(DSMZ=ACC-16)
  • 换液频次:2~3次/周
  • 传代比例:1:2-1:4(具体依据实际细胞量决定)
  • 传代时细胞密度应保持在8X106/ml,不得超过1X106/ml

培养基推荐配方

使用RPMI-1640培养基(中乔新舟货号:ZQ-200)配以10%胎牛血清(中乔新舟货号:ZQ0500),1%双抗(中乔新舟货号:CSP006)以及终浓度为0.05 mM的β-巯基乙醇(中乔新舟货号:CSP005)。β-巯基乙醇作为常用培养添加剂,具有抗氧化特性,可以降低对THP-1细胞的氧化压力。在细胞密度较高时,可以适当增加其用量(不超过标准量的15倍)。

THP-1细胞复苏

THP-1细胞在复苏后通常需要3-5天恢复状态,对密度有一定依赖性。如果在复苏过程中去除了冻存液,建议在复苏后48小时内不要操作。低密度时细胞在生长阶段会呈现聚团现象,属正常尤为常见。

THP-1细胞的传代

  • THP-1细胞为悬浮细胞并具有低密度依赖性,当细胞浓度达到8×105个活细胞/mL时即需进行传代,细胞密度不得超过1×106活细胞/mL。
  • 通常传代比例为1:2-4,分瓶后可补充新鲜完全培养基,不需离心,T25培养瓶分瓶后可补充至7 ml。
  • 如对悬浮细胞密度控制不佳,最佳方式为进行细胞计数。
  • 培养约一周可进行一次离心,以去除部分死细胞。

THP-1细胞的冻存

  • 临床应用可采用10%DMSO的冻存液:900 µl FBS + 100 µl DMSO,操作需小心。
  • 收集状态良好的细胞于15 mL离心管中,调整细胞浓度至200万-300万/mL以便进行冻存。
  • 可放入-80℃培养箱保存最多3个月,尽快转移至液氮中进行长期保存。

THP-1培养常见问题

  1. 聚团现象:少量细胞聚团,特别在低密度时属正常。若密度过高可通过观察细胞状态、调节β-巯基乙醇的添加量、更换血清品牌或调整血清比例(不超过20%)来改善。
  2. 贴壁问题:少量细胞贴壁属于正常现象,通过轻轻吹打可将其收回,若贴壁细胞高于20%,需检查培养环境及培养基成分。
  3. 复苏困难:若复苏率较低,可在冻存时增加细胞量。复苏后需给予3-5天的恢复时间,细胞密度过低时避免频繁离心,换液不全更换。

通过上述信息,可以更好地了解和应用尊龙凯时的THP-1细胞,为相关医疗及生物学研究提供支持。