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尊龙凯时TurboTEV蛋白酶助您高效掌控蛋白质活性

发布时间:2025-03-27   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的TurboTEV蛋白酶是经过增强的烟草蚀刻病毒(TEV)N1a蛋白催化片段,属于半胱氨酸蛋白酶,可特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly的切割位点,并在Gln与Gly之间进行降解。该酶在4°C下表现出强大的活性,且具有高特异性和稳定性。TurboTEV蛋白酶不依赖于特殊的缓冲液,可在适合所需目标蛋白的缓冲条件下进行使用。

尊龙凯时TurboTEV蛋白酶助您高效掌控蛋白质活性

TurboTEV蛋白酶的分子量为52kDa,并带有GST和His标签,便于通过Ni亲和层析或谷胱甘肽(GSH)树脂轻松去除融合标签。该酶源自大肠杆菌,其活性超过10单位/µg,1单位TurboTEV蛋白酶在30°C下可在1小时内切割3µg底物的85%。

尊龙凯时提供的示例协议包括以下步骤:首先,在冷却的透析缓冲液中进行蛋白质的裂解。建议的透析缓冲液包括:25mM Tris-HCl(pH 8.0)、150-500mM NaCl和14mM β-巯基乙醇。接下来,需要将目标蛋白样品稀释至1-2 mg/mL,并留存部分未切割样品以供分析。

加入TurboTEV蛋白酶的比例为1:100(w/w),即100mg目标蛋白对应10000单位(1mg)的TurboTEV蛋白酶。然后在4°C下透析约16小时以完成切割反应,最后可以通过柱分离和SDS-PAGE分析确认效果(可选)。

该产品的应用包括:蛋白质的特异性裂解、从重组蛋白中去除融合标签、以及蛋白质和肽的纯化。

常见问题解答:

1. 在TEV消化反应中,缓冲液条件非常重要。以下成分可能对TurboTEV的剪切效率产生不利影响:(a) 1mM DTT;(b) 不推荐使用10%的甘油;(c) 不推荐使用20mM组氨酸;(d) 不建议使用500mM NaCl;(e) 不建议使用100mM Tris;(f) β-巯基乙醇的功能与DTT类似,可以加入。

2. 在剪切之前,交换缓冲液以适应目标蛋白质可能是必要的。

尊龙凯时致力于为生物医疗领域的研究和开发提供高质量的产品服务。我们不断推动生物学、分子生物学和细胞生物学领域的发展,以期为学术界和工业界的科学研究提供强有力的支持。